青花菜小孢子再生植株加倍及倍性鉴定
的分离、培养与植株再生小孢子的分离、培养与植株再生方法参照张振超等[8]的方法。1.3 秋水仙碱加倍处理将生长旺盛、根系健壮的再生植株在室温条件下炼苗3~5 d,从培养基中取出,把培养基清洗干净,先把根部浸入到质量百分比浓度为75%~80%的百菌清800~1 000倍液中杀菌5 min,捞出控水后移栽到装入营养土的穴盘中,置于温室中培养。用塑料薄膜遮盖保湿,并遮盖黑色遮阳网,以备光照强度大时遮阳。温室内白天温度控制在(28±5)℃、夜晚温度在(25±3)℃,光照为自然光照,在光照强烈时遮盖黑色遮阳网以降低温度。生长1周后,取出幼苗,用自来水洗净根部表面的营养土后,把植株根部浸入浓度为200 mg/L的秋水仙碱溶液中20 h,后用自来水冲洗干净,重新栽入到营养土中适应生长,10 d后移栽入大田。1.4 再生植株倍性鉴定1.4.1 1% I-KI染色法观察保卫细胞叶绿体参考袁素霞等[7]的方法。取再生植株新鲜叶片,用卡诺固定液(无水乙醇∶冰醋酸=3∶1)处理至叶片颜色褪去为止。切取部分褪色叶
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