青花菜小孢子再生植株加倍及倍性鉴定
片，在无菌水中浸泡3～5 min后取出，置于载玻片上，用1% I-KI染色30 s，盖上盖玻片后计数即可。1.4.2 FDA荧光染色法观察保卫细胞叶绿体采用Michael等[6]的方法。用0.01% FDA对叶片下表皮进行染色，采用倒置荧光显微镜进行观察并拍照。在荧光显微镜下，被FDA染色的叶绿体发出绿色荧光，没有被染色的呈现红色。每个植株取2个叶片，显微镜下随机观察10个视野，统计气孔长度以及叶绿体数目。1.4.3 流式细胞仪倍性分析参照张振超等[8-9]的测定方法，以普通二倍体嫩叶作对照。1.5 数据分析所得数据采用SAS软件进行差异显著性分析，并在0.05水平上进行Duncan多重比较分析。2 结果与分析2.1 小孢子再生植株自然加倍结果小孢子再生植株驯化后移栽到营养土上生长5 d，取植株幼嫩叶片进行倍性检测，通过流式细胞仪可以清楚地鉴定出倍性水平，结果见表1和图1。在里绿、美绿410、久绿3个青花菜材料小孢子再生植株群体中，单倍体和二倍体所占比例最大，单倍体分别为45%、50%、45%，二倍体分别为45%、50%、50%。另外
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